ELISA检测
定义
ELISA 检测全称(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA) 指将可溶性的抗原或抗体吸附到聚苯乙烯等固相载体上,进行免疫反应的定性和定量方法。优质的试剂,良好的仪器和正确的操作是保证ELISA检测结果准确可靠的必要条件。ELISA的操作因固相载体的形成不同而有所差异,国内医学检验一般均用板式点。
原理
①使抗原或抗体结合到某种固相载体表面,并保持其免疫活性。② 使抗原或抗体与某种酶连接成酶标抗原或抗体,这种酶标抗原或抗体既保留其免疫活性,又保留酶的活性。在测定时,把受检标本(测定其中的抗体或抗原)和酶标抗原或抗体按不同的步骤与固相载体表面的抗原或抗体起反应。用洗涤的方法使固相载体上形成的抗原抗体复合物与其他物质分开,最后结合在固相载体上的酶量与标本中受检物质的量成一定的比例。加入酶反应的底物后,底物被酶催化变为有色产物,产物的量与标本中受检物质的量直接相关,故可根据颜色反应的深浅刊物定性或定量分析。由于酶的催化效率很高,故可极大地放大反应效果,从而使测定方法达到很高的敏感度。
ELISA可用于测定抗原,也可用于测定抗抗体。在这种测定方法中有三个必要的试剂:
1、固相的抗菌素原或抗抗体,即"免疫吸附剂"(immunosorbent);
2、酶标记的抗原或抗抗体,称为"结合物"(conjugate);
3、酶反应的底物。根据试剂来源和标本情况以及检测具体条件,可设计出各种不同类型的检测方法。
ELISA主要有以下几种类型:
1、双抗抗体夹心法测抗原 2、双抗原夹心法测抗体 3、间接法测抗抗体 4、竞争法测抗体 5、竞争法测抗原 6、捕获包被法测抗体 7、ABS-ELISA法
注意事项
1、客户收集标本前必须清楚要检测的成份是否足够稳定。
2、对收集后当天进行检测的标本,储存在4℃备用。
3、对因特殊原因需要周期收集的标本,需将标本及时分装后放在-20℃或-70℃下保存,并避免反复冻融。
4、标本2-8℃可保存48小时,-20℃可保存1个月,-70℃可保存6个月。
客户提供
1、实验样本:包括血清、血浆、尿液、胸腹水、脑脊液、细胞培养上清等,邮寄前请与我公司技术支持沟通确认。
2、检测试剂盒(或用我公司提供的检测试剂盒)。
3、尽可能详细的背景资料。
终产品
详细的实验数据,完整的实验报告。