慢病毒(LV)构建与包装

2019-05-09

慢病毒构建与包装


定义


慢病毒是逆转录病毒的一种,具有逆转录病毒的基本结构和特性:整合入宿主细胞基因组,长期表达,可用于转基因动物制备;但也有不同于逆转录病毒的组分和特性:比逆转录病毒具有更高的滴度,不仅可以感染分裂期细胞,更重要的,还能感染非分裂期的细胞。利用慢病毒载体,可以研究启动子的调控、过表达特定基因或沉默特定基因。


慢病毒包装系统组成:


慢病毒包装系统一般由慢病毒表达载体和慢病毒包装载体组成。


慢病毒表达载体,即通常所说的穿梭载体,包含了包装、转染、稳定整合所需要的遗传信息。而慢病毒包装质粒可提供所有的转录并包装RNA到重组的假病毒载体所需要的所有辅助蛋白。为产生高滴度的病毒颗粒,需要利用表达载体和包装质粒同时共转染细胞,在细胞中进行病毒的包装, 包装好的假病毒颗粒分泌到细胞外的培养基中,离心取得上清液后,可以直接用于宿主细胞的感染。


慢病毒(Lentivirus) 载体是以HIV-1 (人类免疫缺陷Ⅰ型病毒)为基础发展起来的基因治疗载体。区别一般的逆转录病毒载体,它对分裂细胞和非分裂细胞均具有感染能力。所以,在体外实验及体内实验的研究中,慢病毒己经成为表达外源基因或外源shRNA的常用载体形式之一, 并且正在获得越来越广泛的应用。


一般实验流程


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客户须知


客户需提供已通过文献查询或实验证明的有效靶点序列信息的shRNA的序列


服务内容

1、我们按照客户要求完成shRNA慢病毒产品的制备,可以提供慢病毒shRNA质粒和shRNA慢病毒产品等。

2、定制RNAi慢病毒产品可直接用于细胞系,原代细胞,干细胞,动物组织等的感染,表达shRNA。


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