腺相关病毒（AAV）构建与包装

定义

腺相关病毒(adeno-associated virus, AAV)是简单的非病原单链DNA，需要辅助病毒(通常为腺病毒)参与复制。它编码两个末端的反向重复序列(ITR)中的cap和rep基因。ITRs对于病毒的复制和包装具有决定性作用。cap基因编码病毒衣壳蛋白，rep基因参与病毒的复制和整合o AAV能感染多种细胞。rep基因产物存在时，病毒DNA很容易整合到人类第19号染色体。

重组腺相关病毒载体特点：

重 组腺相关病毒载体(rAAV) 源于非致病的野生型腺相关病毒，由于其安全性好、宿主细胞范围广(分裂和非分裂细胞)、免疫源性低，在体内表达外源基因时间长等特点，被视为最有前途的基 因转移载体之一，在世界范围内的基因治疗和疫苗研究中得到广泛应用。经过10余年的研究，重组腺相关病毒的生物学特性己被深入了解，尤其是其在各种细胞、 组织和体内实验中的应用效果方面已经积累了许多资料。在医学研究中，rAAV被用于多种疾病的基因治疗的研究(包括体内、体外实验)；同时作为一种有特点 的基因转移载体，还广泛用于基因功能研究、构建疾病模型、制备基因敲除鼠等方面。

表达基因用腺相关病毒包装流程

1、客户选择目的基因、表达载体，进行实验设计

2、客户提供目的基因

3、将目的基因CDS区构建至腺相关病毒表达载体上

4、AVV小量包装，摸索包装条件及确认病毒滴度

5、根据客户需要，大量包装目的腺相关病毒

表达shRNA用腺相关病毒包装流程

1、客户选择靶基因或目的shRNA、表达载体，进行实验设计

2、将目的shRNA构建至腺相关病毒载体上

3、有效shRNA筛选（筛靶套餐，保证至少一条shRNA有效，可选）

4、AVV小量包装（两盘），摸索包装条件及确认病毒滴度

5、根据客户需要，大量包装目的腺相关病毒

客户须知

1、客户应提供所要构建腺相关病毒的目的基因的序列及其它相关说明信息(例如装载载体、质粒图谱、酶切位点等)。

2、客户应对所提供的材料及信息、负责，如因客户提供的材料及信息不准确而引起的实验延误或经济损失由客户承担；

3、如shRNA序列由客户提供，则本公司只负责证明包含有该shRNA序列的腺相关病毒构建成功，而不对其干扰效率做任何保证。